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VVC患者与健康育龄妇女的阴道微生态比较

作者:廖琪|岳新爱|彭英|陈平|吴秀丽|唐袁婷|胡正强
现代临床医学 2016-3-22 阅读 字号:T|T

外阴阴道假丝酵母菌病(volvovaginacandidiasisVVC)是一种由假丝酵母菌的条件致病菌引起的外阴阴道炎症。有研究显示,VVC是假丝酵母菌在宿主外阴、阴道以及阴道环境相互作用的结果。国外显示约75%的女性一生中患过1VVC45%的女性经历过2次及以上的发作。国内14所医院对VVC患者的流行病学的研究发现,妇科门诊患者以阴道炎症最多(31.3%),在阴道炎中VVC又居首位(11.6%)。外阴阴道假丝酵母菌病治疗效果好,但复发率高的问题是一直困扰广大女性的问题。它是一种内源性的难治性疾病。VVC的发生与阴道内环境的变化有着很大的关系。阴道内乳酸杆菌的减少往往是VVC发生的基础,当阴道生态平衡被打破,或有外源性的病原体入侵时,就会导致VVC的发生。所以我们可以通过微生态的指标以及菌群的密集度、多样性来观察VVC与健康人群的差异。现报道如下。

材料与方法

对象  调查201447月来我院妇科门诊就诊并有较好依从性和易于随访的VVC患者199例,为VVC组。并在同时间段抽取正常健康女性412例,为健康对照组。分析比较2组现病史、既往病史、年龄、诊断等资料。

VVC和健康人群的筛选  (1)症状:外阴瘙痒,伴有尿痛并性交痛的症状,白带增多。(2)体征:阴道分泌物呈白色豆腐渣样,且外阴潮红、水肿,并伴明显抓痕。(3)实验室检查:阴道分泌物以及微生态由专业医生取到后,送至检验科检查(确保整个过程不受其它外界环境的污染)。记录阴道微生态检查结果。

仪器和试剂  革兰染液由贝索生物技术有限公司提供;细菌性阴道病联合检测试剂盒由珠海丽珠生物技术有限公司提供;烤片机、染色架、显微镜、孵育仪。

标本采集  由专业医师用无菌棉拭子自阴道侧壁上1/3处旋转留取阴道分泌物,装入干净隔离的塑料瓶中送检。

实验室检查  标本运送至检验科后,用烤片机烘干1 min固定后,进行革兰染色。(1)初染。将放有涂片标本的染色架放入结晶紫乙醇饱和液缸内,染色约10 s,自来水冲洗干净。(2)媒染。将染色架吸干多余水分后,放入碱性碘液缸内,染色约15 s,自来水冲洗。(3)脱色。将染色架吸干多余水分后,放入30%丙酮酒精缸内,脱色520 s,自来水冲洗。(4)复染。将染色架吸干多余水分后,放入碱性复红乙醇饱和液缸内,染色约40 s,自来水冲洗干净。(5)烤干。VVC组和健康对照组均行阴道微生态检查。阴道微生态检查方法:先用细菌性阴道病联合检测试剂盒检测pH值、唾液酸酶、过氧化氢和白细胞酯酶;涂片革兰染色后,由显微镜观察VVC组和健康对照组阴道分泌物镜下的形态,包括假丝酵母菌孢子、假菌丝、芽生孢子、细菌群密度、菌群多样性、乳酸杆菌、乳酸杆菌分级、Nugent评分、白细胞、清洁度、线索细胞等并记录。微生态指标如唾液酸酶、pH值同时记录。由于过氧化氢受外界因素影响,白细胞酯酶为破坏白细胞释放的酯酶,仅反映既往炎症状况,均排除本研究。

阴道微生态判断标准  阴道微生态正常的标准是正常菌群密度和菌群多样性为Ⅱ~Ⅲ级、优势菌为乳酸杆菌、清洁度Ⅰ~Ⅱ度、过氧化氢(乳酸杆菌功能)阴性、白细胞酯酶以及唾液酸酶(厌氧菌指标)阴性、阴道pH4.5

微生态指标的判断标准  乳酸杆菌分级是根据与其他菌群的消长关系进行分级。Ⅰ级:许多多形乳杆菌,无其他细菌。Ⅱa级:混合菌群,主要为乳杆菌。Ⅱb级:混合菌群,但乳杆菌比例明显减少。Ⅲ级:乳酸菌严重减少或缺失,其它菌群过度生长。Nugent评分为BV诊断的实验室金标准,其诊断方法为:03分为正常,46分为临界范围,710分可诊断BV。菌群密集度是指在油镜下观察每视野平均细菌数,Ⅰ级(+)19个,Ⅱ级(++)1099个,Ⅲ级(+++)100999个,Ⅳ级(++++)细菌聚集成团。菌群多样性表示在油镜下观察辨别每视野细菌种类,Ⅰ级(+)13种细菌,Ⅱ级(++)46种细菌,Ⅲ级(+++)710种细菌,Ⅳ级(++++)11种及以上细菌。

数据的处理  本实验选取菌群密集度、菌群多样性、乳酸杆菌、乳酸杆菌分级、唾液酸酶、Nugent评分、白细胞、清洁度、线索细胞、pH值、年龄这11个指标,以此对比VVC组和正常健康人群的微生态结果差异。将结果进行量化,以便进行统计学的分析。将所有项目结果中的未见和阴性均量化为0,查见和阳性以及弱阳量化为1;线索细胞:未见量化为01%20%1,>20%2;白细胞:05个为量化0515个为115302,>30个为3;乳酸杆菌:<1个量化为015/油镜量化为1630/油镜为2,>30/油镜为3;菌群密集度和菌群多样性:Ⅰ级量化为1,Ⅱ级为2,Ⅲ级为3,Ⅳ级为4;乳酸杆菌分级:Ⅰ级量化为1,Ⅱa级为2,Ⅱb级为3,Ⅲ级为4,“无”为0;清洁度:Ⅰ度为1,Ⅱ度为2,Ⅲ度为3,Ⅳ度为4

统计学分析  采用SPSS17.0统计软件分析,计算2组数据的均数、标准差。2组间比较用成组资料比较的t检验。

结果

2组患者年龄和各微生态指标的比较结果详见表1

VVC组和对照组比较,在年龄、菌群密集度、乳酸杆菌、乳酸杆菌分级、唾液酸酶、Nugent评分、白细胞、清洁度、线索细胞方面比较差异有统计学意义(P0.05P0.01),而pH值、菌群多样性方面比较无显著性差异(P0.05)。

讨论

VVC是妇科常见病,容易治疗,但是复发率特别高,也较易转变成复发性外阴阴道假丝酵母菌病(recurrent vulvovaginalcandidiasisRVVC)。其机理不明确,有学者认为可能VVC的发生与阴道局部微生态环境异常有直接关系。而阴道微生态体系是由阴道内正常菌群、机体内分泌调节和解剖生理结构共同组成,在受到内源性和外源性因素的共同影响时,容易发生改变。正常情况下乳酸杆菌为优势菌,可以黏附与竞争性地排斥假丝酵母菌,分解阴道上皮细胞的糖原产生乳酸降低阴道pH值,产生过氧化氢、细菌素、类菌素、表面活性物质,抑制其他细菌的过度繁殖。乳酸杆菌的减少可致菌群失调,给了其他细菌生长的机会,就会引起相应的阴道炎症,从而使pH值、菌群密集度、过氧化氢、乳酸杆菌等一系列微生态指标发生改变。从而对临床上的诊断有很大的帮助。

本次研究发现,2组菌群密集度、乳酸杆菌、乳酸杆菌分级、唾液酸酶、Nugent评分、白细胞、清洁度、线索细胞有显著性差异,说明在VVC患者微生态中菌群密集度、乳酸杆菌、乳酸杆菌分级、唾液酸酶、Nugent评分、白细胞、清洁度、线索细胞存在显著改变。在VVC组与健康对照组的年龄对比中,VVC组显著低于健康对照组,表明低年龄育龄妇女容易感染VVC。而对于VVC患者来说,pH值、菌群多样性与健康妇女无显著性差异,这可能与下列有关:(1)样本量较少,还可以扩大样本量;(2)乳酸杆菌还存留一些功能正常能产酸的杆菌,使其pH值变化不大;(3)乳酸杆菌与假丝酵母菌在一定程度上达到了平衡,从而使阴道内的菌群种类控制在正常范围,没有引起其他细菌的过度生长。(4)由于假丝酵母菌的大量繁殖,控制了阴道内的营养来源,而抑制了其他细菌的生长繁殖。

综上所述,VVC患者可以通过阴道微生态检查反映临床上是否治愈或者好转,使阴道微生态成为指导临床医生合理用药的一个重要指标。临床治愈时,有约40%的患者微生态处于紊乱状态,通过积极的恢复阴道微生态环境,复发率可下降2.3%。在VVC患者的治疗过程中通过动态监测微生态的指标变化,临床医生可以根据患者的具体微生态状况而针对性用药,这样既可减轻医生的治疗麻烦又可减轻患者在治疗过程中的痛苦。而对于正常健康育龄妇女,应注重个人卫生,保持阴道微生态平衡,避免VVC的发生。


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